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无血清细胞冻存液与传统细胞冻存液比较显提高

(时间:2018-11-26 11:38  来源:未知   作者:zzhong   点击:次)
无血清细胞冻存液与传统细胞冻存液比较显提高大部分细胞冻存存活率

传统细胞冻存液简介
成份:新鲜培养基,含10%胎牛血清和5-10%DMSO。
冻存方法:冷冻管置于4℃ 10分钟→-20℃ 30分钟→-80℃ 16-18小时(或隔夜)→液氮长期储存。-20℃不可超过1小时,以防止冰晶过大,造成细胞大量死亡。
 
必拓生物无血清细胞冻存液简介
成份:不含血清,含DMSO、葡萄糖等各种细胞营养成分、pH调节剂等成分。不含动物来源性蛋白,能减少各类病毒、霉菌和支原体等污染,确保冻存细胞安全。通用于各种动物细胞株。
冻存方法:细胞沉淀加无血清细胞冻存液,直接放入-80℃长期储存即可。
 
可见无血清细胞冻存液的优势:即用型,通用性,简单、安全、高效
附表1. 必拓生物无血清细胞冻存液与传统细胞冻存液对比
  传统细胞冻存液 必拓生物无血清细胞冻存液
安全性 动物来源病毒、霉菌和支原体等污染的风险高 无动物来源病毒、霉菌和支原体等污染的风险
冻存细胞种类 适合含血清细胞冻存 适合各类细胞冻存,尤其是无血清培养细胞
无血清培养细胞生长状态 易改变易由悬浮状态回复贴壁状态 保持悬浮培养状态
批次差异 批次差异大 无批次差异
操作方法 较复杂 简单快捷
保存设备 要求高(液氮) 要求低(低温冰箱)
操作安全性 低(易发生冻伤和爆裂)
微量冻存 细胞易死亡,存活率低 细胞存活率高
整板冻存 不可行 可行,且方便快捷

附表2. 必拓生物无血清细胞冻存液冻存细胞存活率测试数据
表2.1  6h后实验组和对照组细胞存活率比较(实验组均使用必拓生物无血清细胞冻存液
细胞名称 基因修饰-种属-来源 实验组存活率(6h) 对照组存活率(6h) 显著性差异 对照组细胞冻存液
GFP-MDA-MB-231 GFP标记-人乳腺癌 92.44 90.08 * L15+FBS+DMSO
EGFR-KO-MDA-MB-231 敲除EGFR-231 84.97 65.35 *** L15+FBS+DMSO
MCF-7 人乳腺癌 83.33 80.2 *** DMEM+FBS+DMSO
ER-KO-MCF-7 敲除雌激素受体 MCF7 71.61 41.05 *** DMEM+FBS+DMSO
4T1 小鼠乳腺癌 92.58 - 92.26 - RPMI1640+FBS+DMSO
A549 人非小细胞肺癌 81.32 80.5 * F12K+FBS+DMSO
Capan-1 人胰腺癌 88.93 83.18 * IMDM+FBS+DMSO
IR-KO-Capan-1 敲除胰岛素受体-Capan-1 46.46 27.84 *** IMDM+FBS+DMSO
AsPC-1 人胰腺癌 58.94 44.3 *** RPMI1640+FBS+DMSO
PANC-1 人胰腺癌 89.66 85 ** DMEM+FBS+DMSO
PAN02 小鼠胰腺癌 78.42 67.91 *** DMEM+FBS+DMSO
IR-KO-PANO2 敲除胰岛素受体-PANO2 46.87 30.78 *** DMEM+FBS+DMSO
HUVEC 人脐静脉内皮细胞 -   - - F12K+FBS+DMSO
VEGFR-KO-HUVEC 敲除VEGFR-HUVEC -   - - F12K+FBS+DMSO
bEnd 3 鼠脑微血管内皮细胞 72.96 - 71.28 - DMEM+FBS+DMSO
HACAT 人皮肤角质细胞 90.95   93.51 ** DMEM+FBS+DMSO
B16 鼠源黑色素瘤 85.51 84.51 * DMEM+FBS+DMSO
TSC2-KO-B16 敲除TSC2-B16 57.45 45.11 *** DMEM+FBS+DMSO
HT-29 人结肠癌 78.39 75.69 * McCoy+FBS+DMSO
PC 3 人前列腺癌 71.7 73.44 ** RPMI1640+FBS+DMSO
HepG2 人肝癌 90.34 88.01 * DMEM+FBS+DMSO
Hela 人宫颈癌 93.18 91.91 * RPMI1640+FBS+DMSO
293T 人肾上皮细胞 95.58 - 95.16 - DMEM+FBS+DMSO
K562 人慢性髓原白血病细胞 80.27 82.47 ** RPMI1640+FBS+DMSO
imDC 人原代不成熟DC细胞 56.75 51.32 *** RPMI1640+FBS+DMSO
spermatogonial stem cell 小鼠原代精原干细胞 62 47.59 *** MEM+FBS+DMSO


表2.2  24h后实验组和对照组细胞存活率比较(实验组均使用必拓生物无血清细胞冻存液
细胞名称 基因修饰-种属-来源 实验组存活率(24h) 对照组存活率(24h) 显著性差异 对照组细胞冻存液
GFP-MDA-MB-231 GFP标记-人乳腺癌 97.7 - 97.4 - L15+FBS+DMSO
EGFR-KO-MDA-MB-231 敲除EGFR-231 80.46 62.7 *** L15+FBS+DMSO
MCF-7 人乳腺癌 89.09 86.48 * DMEM+FBS+DMSO
ER-KO-MCF-7 敲除雌激素受体 MCF7 73.34 40.6 *** DMEM+FBS+DMSO
4T1 小鼠乳腺癌 96.25 94.87 * RPMI1640+FBS+DMSO
A549 人非小细胞肺癌 84.8 76.12 *** F12K+FBS+DMSO
Capan-1 人胰腺癌 - - - - IMDM+FBS+DMSO
IR-KO-Capan-1 敲除胰岛素受体-Capan-1 50.03 20.18 *** IMDM+FBS+DMSO
AsPC-1 人胰腺癌 61.08 42.79 *** RPMI1640+FBS+DMSO
PANC-1 人胰腺癌 90.96 89.42 * DMEM+FBS+DMSO
PAN02 小鼠胰腺癌 81.7 70.9 *** DMEM+FBS+DMSO
IR-KO-PANO2 敲除胰岛素受体-PANO2 46.58 24.58 *** DMEM+FBS+DMSO
HUVEC 人脐静脉内皮细胞 88.14 85.75 * F12K+FBS+DMSO
VEGFR-KO-HUVEC 敲除VEGFR-HUVEC 60.91 31.72 *** F12K+FBS+DMSO
bEnd 3 鼠脑微血管内皮细胞 78.7 76.95 * DMEM+FBS+DMSO
HACAT 人皮肤角质细胞 - - - - DMEM+FBS+DMSO
B16 鼠源黑色素瘤 - - - - DMEM+FBS+DMSO
TSC2-KO-B16 敲除TSC2-B16 60.67 40.86 *** DMEM+FBS+DMSO
HT-29 人结肠癌 80.41 - 80 - McCoy+FBS+DMSO
PC 3 人前列腺癌 89.33 84 *** RPMI1640+FBS+DMSO
HepG2 人肝癌 - - - - DMEM+FBS+DMSO
Hela 人宫颈癌 - - - - RPMI1640+FBS+DMSO
293T 人肾上皮细胞 - - - - DMEM+FBS+DMSO
K562 人慢性髓原白血病细胞 84.49 80.3 * RPMI1640+FBS+DMSO
imDC 人原代不成熟DC细胞 61.89 51.66 *** RPMI1640+FBS+DMSO
spermatogonial stem cell 小鼠原代精原干细胞 70.24 44.6 *** MEM+FBS+DMSO
 
 
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